PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)：PCR實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)污染是什么原因？

　　PCR實(shí)驗(yàn)室又稱基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室，它利用分子生物學(xué)技術(shù)對核酸片段進(jìn)行擴(kuò)增，也可視為一種特殊的核酸體外復(fù)制。 利用基因追蹤系統(tǒng)掌握人體含量，檢測精度可達(dá)納米級，現(xiàn)在PCR技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于傳染病、腫瘤靶向、生殖遺傳學(xué)等領(lǐng)域，但由于該技術(shù)對待測核酸進(jìn)行了大量的多次檢測，即使是少量的污染也容易造成假陽性結(jié)果。 其次，PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)要求比較高，實(shí)驗(yàn)過程復(fù)雜，如果中間環(huán)節(jié)有疏漏，可能會造成假陰性結(jié)果。

　　PCR實(shí)驗(yàn)過程當(dāng)中容易發(fā)生污染，造成污染的主要原因有四種：

　　1、PCR產(chǎn)物的污染。 這也是PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)污染的常見原因，PCR產(chǎn)物重復(fù)擴(kuò)增后，拷貝量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR的檢測限，因此即使是少量的污染也足以造成假陽性檢測結(jié)果。

　　2、試劑污染。 在制備試劑的過程當(dāng)中，試劑因接觸受污染的容器、移液管、移液器吸頭、溶液等而受到污染。

　　3、待測樣品被污染。 放置樣品的容器被污染或由于容器密封不嚴(yán)造成樣品與外界接觸被污染; 其次，在核酸提取過程當(dāng)中使用了被污染的移液器或移液器吸頭，造成PCR實(shí)驗(yàn)室受到污染; 此外，有些樣品含有雜質(zhì)，如果它們散布在空氣中，可能會發(fā)生交叉污染。

　　4、氣溶膠污染。 如果氣溶膠含有病毒和其他污染物并擴(kuò)散到空氣中，很可能會污染 PCR 實(shí)驗(yàn)室，氣溶膠是由空氣和液體表層之間的摩擦產(chǎn)生的。 打開蓋子，搖晃反應(yīng)管，反復(fù)吸入污染進(jìn)樣器的樣品會形成氣溶膠，造成交叉污染，根據(jù)計算，一個氣溶膠粒子可以包含 48,000 個副本，因此，應(yīng)特別注意氣溶膠造成的污染。

　　只要PCR實(shí)驗(yàn)室受到污染，之前的結(jié)果報告就會失效，其他實(shí)驗(yàn)操作無法進(jìn)行，因此，必須找到污染源并徹底清除，才能獲得準(zhǔn)確有效的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。