PCR實驗室的建立步驟

PCR實驗室又稱基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈反應的簡稱。它是一種用于擴增特定DNA的分子生物學技術，可視為體外特殊的DNA復制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng)，可以以納米級的精度快速掌握患者體內(nèi)的雜質(zhì)含量。下面我們來簡單了解一下PCR實驗室的建立。

1、建立樣品制備區(qū)

該區(qū)域?qū)Ｓ糜跇悠分苽?。制備和操作核酸提取試劑時的注意事項：

(1)PCR產(chǎn)物和有待擴增序列的DNA克隆不可在本室操作。

(2)將組織培養(yǎng)物、組織標本和血清樣品帶入PCR實驗室的制樣室進行處理，根據(jù)應用需要提取DNA或RNA。

(3)用于樣品處理的工具不可作為普通的分子克隆工具使用，也不可用于操作目標序列。

(4)處理DNA樣品時，應有專用保護裝置或正壓活塞移液器，避免吸樣時留下氣溶膠。

(5)大體積樣品應使用單包裝一次性移液器吸取。

(6)開管前先離心一小段時間，以減少氣溶膠的產(chǎn)生。不要強行倒塌，以免產(chǎn)生氣溶膠。

(7)在 PCR 實驗室中始終穿著實驗室工作服和手套。應經(jīng)常更換手套，尤其是在提取過程的每個步驟之間。PCR實驗室外套應專門用于樣品制備室并經(jīng)常清理。

2、樣品制備和RNA-PCR的額外步驟是RNA-PCR需要額外的樣品操作，這增加了樣品之間污染的機會。為了避免這個問題，可以在PCR實驗室的樣品制備區(qū)進行逆轉(zhuǎn)錄步驟。

3、建立PCR實驗室前沿區(qū)

該區(qū)域?qū)Ｓ糜诟鞣N反應的制備。PCR實驗室的前部區(qū)域需要保持清理，不受克隆和樣品制備造成的污染。PCR實驗室前區(qū)需要試劑和準備，尤其是PCR前區(qū)專用的正壓活塞移液器。